第三百六十二章 发现(上)
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第7组,92号。 吉梅对着屏幕上显示的实验编号,填写下编号,将其用胶带贴在试管外壁,作为识别。 这也意味着,她已经完成了92次实验。 像她这样的实验小组还有五个,如果大家进度都相同,则表明他们已经一共做了三百多次实验! 研究就是这样。 重复试验,因为各种条件都已确定,只需要按部就班照着做就行,最多是为了保证正确,多做几次就行了。 而研究性实验,由于试剂添加的种类、数量,或是升降温的温差都不确定,光是对以上两个条件进行排列组合,就能设计出数百种实验流程。再加上数量不等的对比验证实验,一个项目做成千上万次实验,那是再正常不过了。 如此密集的实验,就算设计正确,也需要极大的投入,才能取得一点成绩。 若是最初的设计方向就错了,那整个投入都毫无意义。 由此可见,研究就是烧钱。 没有钱,什么研究都搞不起来。 即便是毫不吝惜的投入,也不见得就能取得想要的结果,更多的可能是一无所获。 pcr是基因的定向培育。 但光是为了一个定向的确定,就涉及到很多条件,再到培育扩容,所需的条件就更庞大,需要进行的实验也就更多。 吉梅将试管放入自动滴液机搁置架,照着屏幕上列出的条件,输入所需滴入试剂的名称、数量,检查没有输错以后,按下了确认按钮。 一个针头从滴液机垂下,后面拖着软管,针头伸入试管,然后挤出了一串水珠,落在试管之内。 堪堪快到五毫升的量,针头不再出水,最后一滴试液,也顺着细滑的针头,滴入试管。 刚好五毫升,不多也不少。 针头起起落落,将一种又一种试剂,精确定量地滴入试管,完成调配。 吉梅很是感慨。 有了这些设备,实验的准确性、成功率提升何止十倍。她在上学、原单位的时候,可没有这么优良的设备可用,所有的试剂调配、注入全都是手工cao作,试剂的纯度容易出现偏差,手工注入的量也有多有少,导致实验的成功率大为降低。 大家都知道有好的设备,实验成功的几率会大幅上升,可是又有几家单位能够配得起呢。 他们这几个实验室内,配置的各种实验仪器,好多她以前听都没听说过,先进之处让她瞠目结舌。而这些仪器的价值,据她所知,不下数千万! 换个零件,都要几百上千块! 做一次实验所用的各种高纯度试剂,价值就一两千! 这样的投入,别说她原来的单位了,就是国家级的大型研究机构,也不见得用得起。 吉梅摇摇头,甩掉脑中的感慨,取出试管,用一个专用的铁盖盖住试管口,然后放入加热仪。 根据pcr技术原理,dna聚合酶这种天然存在于生物体内的物质,会在细胞分裂前进行dna的复制。pcr就是利用它,来完成细胞的克隆。 通过加温,使得完整的基因链熔断为两条单链。 当降温后,聚合酶就会自动融合到每一条单链基因上,生成互补链,又变成一个完整的基因链。 通过不断重复该步骤,就能让较少的目标基因大量复制,从而克隆出较高的浓度。 这台加热仪就是公司利用pcr技术原理,自行研发的,可以精确地控制温度在极短的时间内快速升温和降温。 等托盘收入扩增仪内,吉梅开始输入加热程序。 早前的实验,完全遵循了pcr技术发明人的cao作方法,将温度升高至96摄氏度,以熔断基因链。 但是这样的高温,会破坏连接基因的聚合酶,需要重新添加聚合酶。有了人的参与,实验的稳定性就无法得到保障,失败率很高。 因此重新设计的实验,就是要利用提取的各种聚合酶,来实验它的极限生存温度,以找到一种能够在90摄氏度以上高温仍然具备相当活性的耐热聚合酶。 92号实验的,就是一种在火山温泉内找到的耐热细菌,提取的聚合酶。 而本次实验的方式,其实就是一次完整的pcr实验。 只是选择的是任意一种已知基因序列的基因片段,来作为实验模板。通过实验以后的基因序列对比,来确认聚合酶是否参与了工作,通过浓度高低,来判定它的活性。 前期实验的几十种聚合酶,大都失败,完全没有进行基因复制。个别参与复制的浓度又过低,基本上不具有实用价值。 说实话,能不能找到一种耐热聚合酶,吉梅也没有信心。 但她分到的任务,就是寻找合适的聚合酶。所以不管能不能出成果,她都必须得做下去,直到将所有收集的聚合酶测试完毕,然后提交报告。 加热程序输入完毕,吉梅按下启动按钮,然后就在旁边静静等待结果。 从读数盘上,可以看到加热仪内温度迅速提升到了95摄氏度。这也是熔断基因链的最低温度,再低就无法熔断基因链,也就无法进行下一步的cao作。 两分钟后,温度又从95度,提升到了98度。 吉梅非常紧张。 这是让dna和模板彻底分离的最关键步骤,如果能够熬过这个温度,那后面的都不是问题。 好在加热仪只在98度维持了十秒钟,就迅速降温至58度。 正常情况下,聚合酶就开始和单链相融合了。 等待了一分钟以后,温度开始急剧下降,回复到12度的低温状态,这也是长期保存的温度。 由于注入的浓度足够观察,没有重复扩增,只做了一次就结束了整个过程。 托架弹出,吉梅用戴着无菌手套的手,取出试管。 接下来,经过琼脂糖凝胶制备、注入染料、电泳取样,对样品进行检测。 国内传统的检测都是通过显微镜观察,实验室配备的进口仪器,具备了自动检测功能。 很快,一份检测报告就通过打印机,打印了出来。 吉梅撕下打印纸,放到面前一看,顿时一愣,忍不住用手揉了揉眼睛,然后再低头看去,随即就呆住了,迟迟没有动作。